La P3N-PIPO interagit avec la P3 par le domaine N-terminal partagé pour recruter des vésicules de réplication virale et les déplacer d’une cellule à l’autre

© Droits d’auteur, American Society for Microbiology, 2020. Tous droits réservés. La P3N-PIPO, la seule protéine de mouvement dédiée des potyvirus, dirige les protéines d’inclusion cylindriques (CI) du cytoplasme vers le plasmodesme (PD), où les CI forment des structures coniques servant au déplacement intercellulaire. Pour mieux comprendre le déplacement des potyvirus entre les cellules, nous avons caractérisé plus en détail la P3N-PIPO en utilisant le virus de la mosaïque du navet (TuMV) comme modèle. Nous avons découvert que la P3N-PIPO interagit avec la P3 par l’intermédiaire du domaine partagé P3N et que les mutants du TuMV qui ne possèdent pas le domaine P3N, que ce soit dans la P3N-PIPO ou la P3, ne peuvent passer d’une cellule à l’autre. En outre, nous avons constaté que le domaine PIPO de la P3N-PIPO est suffisant pour diriger les CI vers le PD, alors que le domaine P3N est nécessaire pour la localisation de P3N-PIPO sur les vésicules ou les agrégats marqués à la 6K2. Enfin, nous avons découvert que l’interaction entre P3 et P3N-PIPO est essentielle pour le recrutement des CI vers des structures cytoplasmiques contenant la protéine 6K2 et l’association de structures contenant la 6K2 avec des CI localisées dans le PD. Ces données montrent que les domaines P3N et PIPO sont tous les deux indispensables pour le déplacement des potyvirus d’une cellule à l’autre et que les vésicules à 6K2 à proximité des PD résultant d’interactions multipartites entre 6K2, P3, P3N-PIPO et CI pourraient également jouer un rôle essentiel dans ce processus. IMPORTANCE : Les potyvirus comprennent de nombreux virus importants sur le plan économique, lesquels représentent environ 30 % des phytovirus connus. Cependant, il y a encore peu d’informations sur le mécanisme de déplacement des potyvirus d’une cellule à l’autre. Nous montrons ici que la P3N-PIPO interagit avec les CI et les dirige vers le DP par l’intermédiaire du domaine de la PIPO et qu’elle interagit avec la P3 par l’intermédiaire du partagé de la P3N. Nous signalons également que l’interaction entre la P3N-PIPO et la P3 est associée aux vésicules 6K2 et que l’interaction entre ces molécules rapproche les vésicules 6K2 des structures CI situées dans le DP. Ces résultats soutiennent la notion que la réplication et le déplacement des potyvirus d’une cellule à l’autre sont des processus couplés par l’ancrage de complexes de réplication virale à l’entrée des DP, ce qui augmente considérablement nos connaissances sur le déplacement intercellulaire des potyvirus.