Factors affecting nuclear maturation, cleavage and embryo development of vitrified bovine cumulus-oocyte complexes

Nous avons étudié les effets de la technique de cryoconservation, des solutions de vitrification et du temps d’équilibration sur la maturation, le clivage et le développement embryonnaire d’ovocytes de bovins vitrifiés in vitro. Dans une première expérience, nous avons comparé le taux de maturation nucléaire de complexes ovocyte-cumulus (COC) bovins immatures vitrifiés dans la solution de vitrification 1 (SV1) avec des temps d’équilibration différents (0 et 10 min) au moyen de deux techniques de cryoconservation différentes (Cryotop et paillette de 0,25 mL). Le taux de maturation a été plus élevé dans le groupe témoin non vitrifié que dans le groupe vitrifié (61par comparaison à 16 %, P < 0,0001). Le temps d’équilibration n’a pas influé sur le taux de maturation nucléaire (P = 0,964); toutefois, le taux de maturation a été plus élevé dans le cas des COC vitrifiés dans des Cryotop que dans des paillettes (23 par comparaison à 9 %, P = 0,007). Dans la deuxième expérience, nous avons vitrifié des COC bovins dans des Cryotops et utilisé 2 temps d’équilibration (0 et 5 min) dans la SV 1, et 2 types de solutions de vitrification (solution fraîche et solution congelée). Le taux de clivage et la proportion de blastocystes étaient (P < 0,0001) plus élevés dans le groupe témoin des ovocytes non vitrifiés que dans celui des ovocytes vitrifiés (taux de clivage de 93 % par comparaison à 42 %, et proportion de blastocystes de 31 % par comparaison à 0,4 %). Dans le groupe des COC vitrifiés avec les solutions congelées dont le temps d’équilibration était de 5 min, le taux de clivage a été plus élevé (P = 0,05) que dans les autres groupes. Toutefois, la proportion de blastocystes n’était pas différente (P = 0,993) d’un groupe à l’autre. Nous en avons conclu que le Cryotop est une meilleure technique de cryoconservation que la paillette de 0,25 mL pour la vitrification des COC bovins. En outre, un temps d’équilibration de 5 min dans de la solution SV 1 a amélioré le clivage. Par comparaison au groupe témoin, la vitrification en tant que telle a endommagé les COC bovins, ce qui s’est traduit par une maturation nucléaire et un développement embryonnaire médiocres. La vitrification n’a toutefois pas tué immédiatement les ovocytes, car le taux de clivage était acceptable.