Deletion of the AcMNPV core gene ac109 results in budded virions that are non-infectious

Le gène ac109 du virus de la polyédrose nucléaire multiple d’Autographa californica (AcMNPV) est un gène de la nucléocapside dont la fonction dans le cycle biologique du virus n’est pas connue. Pour déterminer son rôle dans le cycle biologique du baculovirus, nous avons utilisé le système de bacmides AcMNPV pour produire un virus présentant une délétion du gène ac109 (vAc109KO). Les études de fluorescence et de microscopie optique ont montré que la transfection avec le vAc109KO résulte en un phénotype d’infection d’une seule cellule. La réplication de l’ADN viral n’est pas touchée et la progression vers les toutes dernières phases de l’infection virale a été mise en évidence par le développement de corps d’inclusion dans les cellules transfectées par le vAc109KO. Le transfert de Western et l’analyse de l’immunofluorescence par microscopie confocale ont montré que la protéine AC109 est exprimée dans le cytoplasme et le noyau tout au long de l’infection. De plus, il s’agit d’une protéine structurale qui a été détectée tant chez le virion bourgeonnant (BV) que chez le virion inclus, et ce, tant dans la fraction de l’enveloppe que de la nucléocapside. Le titrage par qPCR et TCID50 a montré que le vAc109KO produit des BV mais qu’il s’agit de virions non infectieux. La microscopie électronique et la coloration négative ont montré que les BV du vAc109KO ne pouvaient être distingués des BV des virus témoins de type sauvage ou des virus réparés.