Characteristics of strawberry plants propagated by in vitro bioreactor culture and ex vitro propagation method

Nous avons établi un protocole reproductible standard pour la régénération de plantules entières de fraisier (Fragaria ananassa Duch.) « Bounty » au moyen d’une combinaison de milieu gélifié et de système à bioréacteur. Les sépales, les disques foliaires et les demi-pétioles ont produit des bourgeons et des pousses multiples lorsque nous les avons mis en culture pendant 4 semaines sur un milieu gélifié semi-solide renfermant 4 µM de thidiazuron (TDZ) puis pendant encore 4 semaines dans un milieu liquide renfermant 2 µM de TDZ, dans un système à bioréacteur. L’utilisation de seulement 0,1 µM de TDZ dans le bioréacteur induisait également une prolifération des pousses, mais elle inhibait leur élongation. Nous avons ensuite cultivé les pousses in vitro sur milieu gélifié renfermant 2 µM de zéatine, afin qu’elles allongent et produisent des racines. Nous avons cultivé ex vitro les plantules obtenues à partir d’explants de sépale par culture tissulaire en bioréacteur (CTB) et les avons comparées à celles obtenues par culture tissulaire sur milieu gélifié (CTG) ou par la méthode classique faisant appel à des boutures de stolons (BS), quant à la croissance et à la morphologie des plantes ainsi qu’à la teneur en anthocyanes et à l’activité antioxydante des fruits au bout de trois saisons de culture. Les plants CTB et CTG ont produit plus de touffes, de stolons, de feuilles et de fruits que les plants BS, mais le poids total de fruits par plant ne présentait aucune différence significative. Les fruits des plants CTB et CTG avaient une teneur en anthocyanes et une activité antioxydante plus élevées que les plants BS. Par ailleurs, une épreuve au moyen de marqueurs ISSR (intersimple sequence repeat) a révélé que les plants obtenus par culture tissulaire et les plants donneurs témoins présentaient un profil d’amplification homogène, ce qui confirme la fidélité clonale des plants issus du microbouturage. La culture in vitro sur milieux nutritifs renfermant du TDZ et de la zéatine semble avoir induit un taux de ramification juvénile favorisant une meilleure croissance végétative ainsi que la production d’un plus grand nombre de touffes, de stolons, de feuilles et de fruits.