Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus EXON0 (ORF141) is required for efficient egress of nucleocapsids from the nucleus

On sait que l’exon0 (orf141) d’Autographa californica (AcMNPV), virus responsable de la polyhédrose nucléaire, est nécessaire pour le bourgeonnement des virions, c’est-à-dire la production de la forme libre du virus (BV, pour budded virus). La délétion de l’exon0 réduit le taux de bourgeonnement d’un facteur pouvant atteindre les 99 % (Dai et al., 2004, J. Virol. Vol. 78, 9633), mais la fonction ou le mécanisme par lequel EXON0 influe sur le bourgeonnement n’est pas connu. Dans cette étude, nous avons élucidé la fonction de la protéine EXON0 en déterminant où se trouvait cette protéine dans des cellules Sf9 infectées et dans les virions, et en identifiant les interactions entre EXON0 et d’autres protéines virales. Nous avons aussi eu recours à la microscopie électronique pour étudier la localisation des nucléocapsides dans les cellules transfectées par des virus dans lesquels le gène exon0 avait été inactivé (knockout [KO]). Les résultats montrent que les protéines EXON0 se trouvent tant dans le cytoplasme que dans le noyau des cellules Sf9 infectées, et ce, tout au long de l’infection. Les transferts de Western révèlent que les protéines EXON0 sont co-purifiées avec la forme libre (BV) et la forme incluse du virus (ODV, pour occlusion-derived virus). Le fractionnement des composantes de la forme virale BV (nucléocapside et enveloppe) montre que la protéine EXON0 se retrouve avec la nucléocapside. Le criblage double hybride chez la levure, la co-immunoprécipitation et la microscopie confocale ont révélé que cette protéine interagit avec les protéines FP25 et BV/ODV-C42 de la nucléocapside. Les cellules transfectées avec un virus au gène exon0 inactivé (KO) ont produit des quantités équivalentes de nucléocapsides d’apparence normale dans le noyau. En revanche, le nombre de nucléocapsides dans le cytoplasme était de loin inférieur dans les cellules transfectées avec un virus dans lequel le gène exon0 avait été rétabli. Ces résultats viennent appuyer l’hypothèse selon laquelle EXON0 est essentielle au cycle BV, pour que les nucléocapsides passent du noyau au cytoplasme.