A strategy for improvement of postthaw quality of bison sperm

Citation

Hussain, S.A., Lessard, C.J., et Anzar, M. (2013). « A strategy for improvement of postthaw quality of bison sperm. », Theriogenology, 79(1), p. 108-115. doi : 10.1016/j.theriogenology.2012.09.015

Résumé en langage clair

Cryopreservation is useful for conservation of endangered and threatened species including Canadian wood bison and exploitation of genetically superior sires. Bison (Bison bison) semen cryopreservation is not as successful as in cattle. Therefore, it is important to optimize cryopreservation of bison semen to facilitate its use in genetic conservation and in assisted reproductive technologies. In this project, a cryopreservation package for bison semen was attempted. This package included the development of medium, glycerol and antioxidant addition in semen and treatment of sperm with extra cholesterol before cryopreservation. After freezing and thawing, sperm motility improved by 15% and the damage was reduced from 70% to 44%, after treatment with cholesterol.

Résumé

Dans les travaux présentés ici, nous avons cherché à améliorer la qualité du sperme de bison décongelé par l’utilisation de dilueurs à base de zwitterion (ZI), par l’ajout de glycérol à basse température (4 °C), par l’ajout de glutathion réduit au dilueur et par le traitement du sperme avec de la cyclodextrine chargée de cholestérol avant la congélation. Nous avons analysé les paramètres de motilité et les caractéristiques structurales des spermatozoïdes décongelés au moyen d’un analyseur de sperme assisté par ordinateur et d’un cytomètre de flux, respectivement, 0 et 3 heures après incubation du sperme décongelé à 37 °C. Dans la première expérience, nous avons dilué chacun des éjaculats (N = 11) dans du Triladyl (témoins) ou dans du dilueur à base de ZI (Tes-Tris ou HEPES-Tris). En outre, nous avons ajouté au sperme du glycérol à 37 °C ou à 4 °C avant la congélation. Nous avons constaté que les dilueurs n’ont pas d’effet significatif sur la motilité des spermatozoïdes à 0 heure. Toutefois, les valeurs des paramètres de vélocité des spermatozoïdes étaient plus élevées (P < 0,05) avec les dilueurs à base de ZI qu’avec le Triladyl. La population de spermatozoïdes à membranes plasmique et acrosomique intactes était plus importante dans le sperme additionné de Triladyl que dans celui additionné d’un dilueur à base de ZI (P < 0,05). La motilité totale et la motilité progressive, la vélocité moyenne du trajet, la vélocité linéaire, le nombre de spermatozoïdes à membrane plasmique intacte et le nombre de spermatozoïdes à membranes plasmique et acrosomique intactes ne se sont pas améliorés avec l’ajout de glycérol à 4 °C. Dans la deuxième expérience, nous avons dilué le sperme (50 × 10⁶ spermatozoïdes par mL) dans du dilueur Triladyl contenant 0 (témoin), 0,5, 1,0 ou 2,0 mM de glutathion réduit (comme antioxydant) à 37 °C. Les valeurs des paramètres de motilité et des caractéristiques structurales des spermatozoïdes décongelés évalués à 0 heure et le pourcentage de baisse après une incubation de 3 heures ne différaient pas en raison du glutathion réduit ajouté au dilueur (P > 0,05). Dans la troisième expérience, nous avons prétraité le sperme de bison à l’état frais (100 × 10⁶ spermatozoïdes dans 1 mL) avec 0, 1, 2 ou 3 mg/mL de cyclodextrine chargée de cholestérol à 22 °C pendant 15 minutes, puis nous l’avons dilué avec un dilueur d’acide tris-citrique, de jaune d’œuf et de glycérol jusqu’à ce que sa concentration soit abaissée à 50 × 10⁶ spermatozoïdes par mL, après quoi nous l’avons congelé. Pour le sperme traité à la cyclodextrine chargée de cholestérol et décongelé, les valeurs de motilité totale et de motilité progressive étaient plus élevées (P < 0,05), de même que le nombre de spermatozoïdes à membranes plasmique et acrosomique intactes à 0 heure, et le pourcentage de diminution de ces caractéristiques après une incubation de 3 heures était moindre. Nous en concluons que les dilueurs à base de zwitterion (Tes-Tris et HEPES-Tris), la température d’addition du glycérol et le glutathion réduit n’ont pas amélioré de façon significative la qualité du sperme de bison décongelé. Toutefois, le prétraitement à la cyclodextrine chargée de cholestérol a entraîné une amélioration significative de la qualité du sperme de bison décongelé, ce qui devrait en accroître l’utilisation dans les technologies de reproduction assistée.

Date de publication

2013-01-01

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