Proteomic analysis of Bacillus thuringiensis δphaC mutant BMB171/PHB<sup>-1</sup> reveals that the PHB synthetic pathway warrants normal carbon metabolism

Citation

Chen, D., Xu, D., Li, M., He, J., Gong, Y., Wu, D., Sun, M., et Yu, Z. (2012). « Proteomic analysis of Bacillus thuringiensis ΔphaC mutant BMB171/PHB⁻¹ reveals that the PHB synthetic pathway warrants normal carbon metabolism. », Journal of Proteomics, 75(17), p. 5176-5188. doi : 10.1016/j.jprot.2012.06.002

Résumé

Nous avons mis au point un mutant de la souche BMB171 de Bacillus thuringiensis (Bt) chez lequel le gène phaC était inactif et l’avons désigné : BMB171/PHB⁻¹. Ensuite nous avons analysé la physiologie, le métabolisme et la protéomique du mutant ΔphaC et de la souche parentale. Le mutant BMB171/PHB⁻¹ cultivé en milieu peptoné ne contenant que du glucose (5 g/L) comme source de carbone produisait différents acides organiques. Nous avons déterminé les quantités de pyruvate, de citrate, de lactate, d’acétate et de glutamate produites. Chez la souche BMB171, la délétion du gène phaC a donné lieu à 1) un retard de croissance; 2) une augmentation de la consommation de dioxygène, mais une diminution de la densité cellulaire; 3) la stagnation du pH; 4) une surproduction d’acides organiques; 5) une diminution rapide de la densité cellulaire en phase stationnaire et 6) un phénotype incapable de sporuler. Dans l’étude protéomique, nous avons eu recours la qPCR pour reconfirmer que l’absence de protéine PhaC entraîne un chaos métabolique dans lequel la glycolyse est réprimée, tandis que le cycle de Krebs, différentes voies métaboliques futiles et la synthèse de divers acides aminés étaient surexprimés durant la croissance végétative. Il semble donc que B. thuringiensis BMB171 module efficacement son métabolisme du carbone en présence d’une voie de synthèse fonctionnelle du PHB. La présence de cette voie de synthèse permet aux bactéries productrices de PHB de mieux survivre dans différentes conditions environnementales.

Date de publication

2012-09-18