A novel method of transgene delivery into triticale plants using the Agrobacterium transferred DNA-derived nano-complex

La transformation des monocotylédones représente un défi de taille pour les phytobiologistes et les biotechnologues parce qu’il est difficile de transformer ces plantes avec Agrobacterium tumefaciens, et que les autres méthodes de transgenèse, comme la transformation avec des microbilles d’or, ne donnent pas de bons résultats en ce qui a trait à l’expression des transgènes, en raison de l’intégration de molécules d’ADN tronquées. Nous avons mis au point une méthode pour incorporer des transgènes dans les monocotylédones. Elle est fondée sur un nanocomplexe préparé in vitro, qui comprend un ADN transféré, la protéine de virulence D2 et la protéine A recombinée. Le nanocomplexe est inséré dans des microspores de triticale au moyen du peptide de pénétration cellulaire Tat₂. Cette approche permet d’intégrer des copies individuelles de transgènes et prévient la dégradation de l’ADN introduit, permettant ainsi à des copies intactes du transgène de s’intégrer dans le génome des plantes de triticale. Avec cette approche, les transgènes ont été exprimés chez toutes les plantes transgéniques issues d’une microspore qui avait été transfectée avec le complexe d’ADN transféré et de protéines. Cette approche peut facilement remplacer la technique de biolistique utilisée à l’heure actuelle chez les monocotylédones et pourrait se révéler fort utile en biologie et en biotechnologie végétales.