Isolation and characterization of a GCN5-interacting protein from Arabidopsis thaliana

Citation

Gao, M.-J., Hegedus, D.D., Sharpe, A.G., Robinson, S.J., Lydiate, D.J., et Hannoufa, A. (2007). « Isolation and characterization of a GCN5-interacting protein from Arabidopsis thaliana. », Planta, 225(6), p. 1367-1379. doi : 10.1007/s00425-006-0446-2

Résumé

Nous avons isolé la protéine AtEML d’Arabidopsis grâce à son interaction avec l’histone acétyltransférase AtGCN5 dans un système double hybride en levure. Le transfert d’ARN et la RT-PCR montrent que la protéine AtEML est exprimée dans les fleurs, les feuilles, les tiges et les siliques. On a observé, dans la région du promoteur du gène de la protéine AtEML, plusieurs éléments agissant en cis associés à la réponse aux stress biotiques et abiotiques, et on a trouvé que l’accumulation de transcrits AtEML est fonction du froid et de la présence de sel. Les analyses d’interactions protéines-protéines, tant in vitro que in vivo, indiquent que la protéine AtEML interagit avec l’AtGCN5 par l’intermédiaire de la région N-terminale. On a aussi observé que la protéine AtEML active l’expression du gène rapporteur lacZ chez la levure, par recrutement de l’enzyme AtGCN5. Ce recrutement s’accompagne d’une augmentation de l’acétylation de l’histone H3 au promoteur régissant l’expression de lacZ, tel qu’indiqué par l’immunoprécipitation de la chromatine. On a observé un niveau plus élevé d’expression du gène AtEML chez le mutant d’Arabidopsis dont le gène gcn5 a été inactivé par rapport au type sauvage, ce qui signifie que l’expression de la protéine AtEML est régulée par AtGCN5. Ces résultats permettent de supposer que la protéine AtEML pourrait être un facteur de transcription coordonnant l’expression de certains gènes associés à la réponse au stress par son rôle dans le recrutement de l’enzyme AtGCN5 vers le promoteur de ces gènes.