Culture à court terme de tissus ovariens de bovins adultes : comparaison entre la culture sur membrane chorioallantoïdienne et les systèmes de culture in vitro classiques

Citation

Beck, K., Singh, J., Dar, M.A., Anzar, M. (2018). Short-term culture of adult bovine ovarian tissues: Chorioallantoic membrane (CAM) vs. traditional in vitro culture systems. Reproductive Biology and Endocrinology, [online] 16(1), http://dx.doi.org/10.1186/s12958-018-0337-y

Résumé en langage clair

Dans le cadre du Programme canadien des ressources génétiques animales, des tissus ovariens de mammifères sont congelés pour assurer la préservation à long terme de matériel génétique femelle. Il n’existe cependant pas de méthode de cryoconservation universelle pour les tissus ovariens. Dans cette étude, des tissus ovariens de bovins ont été, pendant 5 jours, incubés in vitro (culture non biologique) ou greffés sur la membrane chorioallantoïdienne d’embryons de poussin (MCA) pour établir un système de culture à court terme. En culture sur MCA, des vaisseaux sanguins de poulet se sont développés autour de la greffe ovarienne. Cet indicateur de la santé des tissus ne peut être obtenu dans des conditions in vitro. Le nombre de follicules primordiaux et développés était plus élevé dans la culture sur MCA que dans la culture in vitro classique. Il a été établi que la MCA pouvait servir de système de culture à court terme pour les tissus ovariens de mammifères. Ce système peut être utilisé pour le transport et le développement de tissus ovariens de mammifères cryoconservés.

Résumé

© Les auteurs, 2018. Contexte : Il est important d’utiliser un système de culture approprié pour la croissance des follicules dans les tissus ovariens de bovins adultes. Cette étude visait à évaluer l’efficacité de la culture sur membrane chorioallantoïdienne aviaire (MCA) par rapport à la culture in vitro classique pour la culture à court terme de tissus ovariens de bovins adultes. Méthodes : Des tissus corticaux ovariens (1 à 2 mm3), prélevés sur des vaches adultes abattues, ont été assignés au hasard à des groupes témoins, à des groupes de culture sur MCA ou à des groupes de culture in vitro. Dans le groupe témoin, les tissus ovariens ont été fixés avec du paraformaldéhyde sans mise en culture. Dans les groupes de culture sur MCA et de culture in vitro, les tissus ovariens ont été mis en culture jusqu’à 5 jours, puis fixés. Les tissus ovariens ont été examinés après 0, 1, 3 et 5 jours de culture pour ce qui est de l’angiogenèse, de la morphologie et de la croissance des follicules. Dans tous les groupes, la densité des follicules primordiaux et des follicules en croissance (sains et atrétiques) a été déterminée. Résultats : En culture sur MCA, la densité des vaisseaux sanguins aviaires augmentait (p < 0,01) au fil du temps avec une baisse (p < 0,001) de la densité des vaisseaux sanguins bovins. Les densités de follicules primordiaux sains, de follicules primordiaux atrétiques et de follicules sains en croissance étaient plus élevées (p < 0,05) dans les tissus ovariens cultivés sur MCA que dans les tissus cultivés in vitro. Quel que soit le système de culture utilisé, la densité des follicules primordiaux sains diminuait (p < 0,001) au fil du temps avec une augmentation des follicules sains en croissance au jour 3 (p < 0,01) et une augmentation des follicules atrétiques (primordiaux et en croissance) pendant les 5 jours de culture (p < 0,001). Le nombre de jours de culture a également eu une incidence sur les proportions de follicules primordiaux sains et de follicules atrétiques en croissance (p < 0,001). Conclusions : La culture sur MCA d’embryons de poulet a soutenu les greffes de tissus ovariens de bovins pendant trois jours, ce qui démontre que la MCA peut être utilisée de manière satisfaisante comme système de culture à court terme pour évaluer la santé de tissus ovariens et étudier l’activation et le développement des follicules.

Date de publication

2018-03-09

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