Cucumber necrosis virus p20 is a viral suppressor of RNA silencing

On sait que la protéine p20 codée par le tombusvirus de la nécrose du concombre joue un rôle dans la pathogénicité envers l’hôte. Cette protéine présente une certaine homologie de séquence avec la protéine p19 du virus du nanisme rabougri de la tomate (TBSV, pour Tomato bushy stunt virus) qui supprime le silençage. À l’aide d’une épreuve de silençage génique d’induction virale (VIGS, pour virus-induced gene silencing), nous montrons que p20 est une protéine virale qui supprime le silençage de l’ARN chez les plantes infectées. De plus, un mutant du virus de la nécrose du concombre chez lequel le gène codant la p20 a été inactivé par knock-out a révélé une diminution de l’accumulation d’ARN viral chez les plantes infectées, ce qui concorde avec le rôle de la p20 dans la suppression du silençage de l’ARN. Étonnamment, dans une épreuve de silençage induit par Agrobacterium, nous avons constaté le silençage de l’ARN chez toutes les plantes GFP transgéniques qui avaient reçu la p20 et la GFP. L’analyse détaillée des quantités d’ARNm de GFP dans les plantes qui avaient reçu la p20 par le vecteur bactérien Agrobacterium a révélé qu’au début, la p20 avait bel et bien une activité de suppression, mais que le silençage de l’ARN reprenait rapidement. Les niveaux d’expression de la p20 dans les plantes agro-transformées étaient environ 50 fois plus faibles que le niveau d’expression de la p19 du TBSV, ce qui concorde avec le fait que la quantité de p20 ne suffit pas à supprimer le silençage de l’ARN dans les systèmes de transgenèse par Agrobacterium. Nos résultats semblent indiquer qu’une épreuve de VIGS pourrait servir à identifier les suppresseurs viraux du silençage de l’ARN codés par certains phytovirus. D’après les études de bio-informatique, le mécanisme de suppression du silençage par la p20 serait similaire à celui du suppresseur p19 du TBSV.