Cryoconservation du sperme de taureau sans jaune d’œuf

La cryoconservation du sperme est couramment utilisée pour la conservation des ressources génétiques animales et l’exploitation de taureaux génétiquement supérieurs en insémination artificielle. Le jaune d’œuf, un ingrédient du dilueur de sperme de taureau, a beaucoup été utilisé dans la cryoconservation du sperme de mammifères pour protéger les spermatozoïdes contre le choc initial dû au froid. De même, des dilueurs à base de lait sont utilisés pour le sperme de taureau partout dans le monde. Malheureusement, le jaune d’œuf et le lait sont difficiles à normaliser parce qu’ils varient d’un producteur à l’autre et introduisent une contamination microbienne. L’industrie de l’insémination artificielle est confrontée à des risques de biosécurité liés à l’utilisation de produits d’origine animale (jaune d’œuf et lait) dans les procédures de cryoconservation du sperme [10]. L’Agence canadienne d’inspection des aliments et l’Organisation mondiale de la santé animale ont recommandé que le jaune d’œuf ou le lait utilisé comme dilueur de sperme soient exempts d’agents pathogènes ou stérilisé. Le cholestérol, qui fait partie intégrante de la membrane plasmique des spermatozoïdes, renforce et protège les structures membranaires même en dessous des températures normales. La teneur en cholestérol de la membrane plasmique des spermatozoïdes détermine leur cryotolérance. Les cyclodextrines se lient au cholestérol exogène, forment des complexes solubles et livrent le cholestérol aux membranes cellulaires. Auparavant, le traitement des spermatozoïdes avec de la méthyl-β-cyclodextrine préchargée de cholestérol avant sa dilution dans un dilueur à base de jaune d’œuf permettait d'améliorer la survie après décongélation des spermatozoïdes de taureaux, d’étalons et de porcs. Dans cette étude, nous avons émis l’hypothèse selon laquelle le complexe exogène de cholestérol et de cyclodextrine (CC) pourrait renforcer suffisamment la membrane plasmique du sperme de taureau pour exclure le jaune d’œuf ou le lait des solutions de dilution classiques en raison du risque de biosécurité qu'ils présentent. L’objectif principal de cette étude était de cryoconserver le sperme de taureau sans ajouter de protéines exogènes dans le dilueur. Les objectifs spécifiques étaient de comparer la qualité après la décongélation du sperme de taureau préexposé au complexe cholestérol-cyclodextrine exogène et congelé dans une solution de dilution tris-glycérol (CC+TG) sans jaune d'oeuf par rapport à celui congelé dans un mélange classique de tris-glycérol et de jaune d’œuf (témoin TGJO) pour étudier le rôle du glycérol dans la cryoconservation sans jaune d’œuf, afin de déterminer le profil protéique des spermatozoïdes de taureau congelés dans des solutions de CC+TG et TGJO et d'évaluer la capacité de fécondation in vitro du sperme congelé dans ces solutions de dilution. Dans la première expérience, le sperme a été dilué dans une solution de tris-glycérol et de jaune d'oeuf (TGJO; dilueur témoin) ou traité d’abord avec un complexe de cholestérol-cyclodextrine, puis dilué dans du tris-glycérol sans jaune d’œuf (TG; sans jaune d’œuf, soit CC+TG) à 22 °C ou 4 °C et ensuite congelé. Après la décongélation, les caractéristiques de mobilité des spermatozoïdes étaient similaires entre les solutions de dilution témoin et CC+TG, ainsi qu'entre les différetnes températures d’ajout du glycérol. Dans la deuxième expérience, le sperme a été congelé dans une solution de dilution CC+TG contenant différentes concentrations de glycérol (de 7 à 0 %, v/v). La qualité du sperme décongelé diminuait avec la baisse de la concentration de glycérol dans la solution de dilution TG.